全自动数字分析仪 45 分钟测定心肌肌钙蛋白

2015-11-04 07:05 来源:丁香园 作者:周婷
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肌钙蛋白浓度持续监测是诊断急性心肌梗死的必要部分。此外,急性心肌梗死后近期肌钙蛋白浓度监测能够高度预测远期心脏不良事件。在过去的 20 多年中,通过提高肌钙蛋白检测的灵敏度和分析性,很大程度上实现了早期、可靠的监测肌钙蛋白浓度,并提高了肌钙蛋白试验诊断的准确性。

肌钙蛋白浓度的增高与心脏不良预后的关系是明确的。此外也有报道称除了急性冠脉综合征以外,心肌肌钙蛋白增加对于其他疾病仍有临床意义,如慢性心衰、2 型糖尿病、慢性肾功能不全等疾病。

值得注意的是通过高敏测定方法获得的心肌肌钙蛋白浓度可以用来预防某些药物相关的心脏毒副作用,特别是那些化疗的癌症患者。甚至心肌肌钙蛋白少量的增加也是心脏移植的排斥的早期迹象。

如今对于探索常规监测心肌肌钙蛋白作为早期心脏不良事件的潜在指标的研究日益增多。心肌肌钙蛋白检测技术的预测性使用需要一个具有更高的灵敏度和更准确的分析性能的测定方法。

因此,在单分子阵列技术的基础上,Petr 教授在 Clinical Chemistry 期刊上发表了其开发的一个只需 45 分钟的免疫测定心肌肌钙蛋白 I(cTnI)的全自动数字分析仪及顺肌钙蛋白捕获珠、生物素化的探测器、SβG 共轭化合物、样品稀释剂 4 种试剂。

该检测原理为当一个单分子酶标将底物转换为荧光产物,这个荧光基团在短时间内产生可检测的信号,这样就可以更准确地发现这个基团。在这个阵列中,用视野涵盖>200000 微孔板的照相机,可以同时计算成千上万的单分子信号。

「阳性」和「阴性」的计数更好地构成一个数字信号,其与单酶标记存在或缺失相对应。这超强敏感性允许使用少量的标记试剂,从而降低非特异性的相互反应和大大增加了信号背景比。

该检测方法灵敏度为 0.01ng/L,量化上限为 0.08ng / L,并且 10% 总的变异度在 2.0ng/L。 cTnI 浓度远高于所有测试样本的检测上限,包括来自健康个体的样本。

在分析性能的测定方面毫不逊色的 Abbott 高敏 cTnI 检测方法,其量化上线的变化范围为 4.6 到 8.1ng/L,10% 变异度为 5.6ng/L。同时该检测方法灵敏度为 0.01ng/L,显著低于灵敏度为 0.2ng/L 的 Singulex Erenna cTnI 检测方法。Petr Jarolim 表示相对于其他研究方法,该检测方法是完全自动化的,只要需 45 分钟。

Petr Jarolim 用 2 种方法验证了该检测方法的临床适用性。第一,该检测方法可以对 97.9% 正常人的血清 cTnI 浓度进行定量。第二,通过测量一个队列的心力衰竭患者 cTnI 浓度,并且证实这些浓度明显(P<0.0001)不同于正常组的浓度。

值得注意的是,Petr Jarolim 表明该研究测定不能用于诊断 AMI,因 cTnI 可以很高,用常规免疫容易测量。高灵敏度和高精密度使其适合用于测定少量增加的 cTnI,如运动负荷试验后测试或适合于探索目前来认为对于特定年龄和性别是适当浓度的变化。

由此看来该技术不仅适用于健康的个人的 cTnI 浓度测定和建立个性化参考区间,而且也适用于运动负荷试验后、接受心脏毒性药物的患者的监测、心脏移植的早期移植排斥反应的 cTnI 浓度的变化检测,同时也适用于要求精度和灵敏度高以及分析时间短等其他应用。

全自动超敏数字检测心肌肌钙蛋白Ⅰ单分子阵列技术能够更快更灵敏的检测 cTnI,相比其他传统方法来说,其可以更早更准确地检测到 cTnI 的变化,有较大的实用性,但由于其不能用于急性心肌梗死的诊断,这就大大限制了其应用,相信随着技术的改善,这项技术将会取代传统的 cTnI 检测技术,并在 cTnI 检测史史上留下浓厚的一笔。

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编辑: 张开平

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