自身免疫病相关抗体检测平台，是实验室提供多种自身抗体检测平台，包括：IIFA、ELISA、免疫印迹法、放免法等。针对同一种或同一类自身抗体，存在一种以上的检测方法，根据方法灵敏度和特异性的差异，在出现阳性或可疑结果时，可通过不同的方法进行佐证，以期为临床诊断提供可靠结果。
相信大多数从事自身免疫病抗体实验室检测的同仁，在日常工作中，会遇到各种让人纠结的问题。其中之一便是「ANA（IIFA，间接免疫荧光法）阴性，ds-DNA（ELISA 或免疫印迹法）阳性」，碰到这样的情况，在实验室内部该怎样处理？与临床医生进行沟通时又该如何解释？
「ANA（IIFA，间接免疫荧光法）阴性，ds-DNA（ELISA 或免疫印迹法）阳性。」这种初筛检测结果，并不少见。可能的原因有以下几点：
1. 以 HEp-2 为基质的 ANA IIF 法，在 2014 年 Annals of the Rheumatic Diseases 中专家共识中指出其为「SARD（系统性自身免疫性风湿病）实验室诊断的推荐初筛检测方法」。该方法灵敏度高，这与 HEp-2 细胞的特性相关：约含 100 中以上不同靶点自身抗原；有些自身抗体无需进一步确认实验即可明确（如抗着丝点抗体）；非常有利于多种自身抗体共存的自免病的诊断；可用于发现新的自身抗体。
但同时，其缺点也不容忽视：判断结果存在主观性；难以进行标准化；判读需要培训和专业知识；对一些特定自身抗体敏感度低（如抗 Jo-1 抗体、抗核糖体 P 蛋白抗体、抗 SS-A/Ro60 抗体、抗 Ro52/TRIM21 抗体），这些抗体可溶性较强，在制备基质片的过程中容易丢失；特异性低（有较高的假阳性率）。
2. 抗 ds-DNA 特异性抗体分为高亲和力抗体和低亲和力抗体，高亲和力抗 ds-DNA 抗体对 SLE 诊断有更高的特异性，低亲和力抗 ds-DNA 抗体的特异性不高，在其它风湿免疫性疾病中也会出现。
其常规检测方法有：a. IIFA，包括绿蝇短膜虫法（CLIIF）和马疫锥虫法（TEIIF）；b. ELISA 法；c. Farr 法（放免法）；d. DIGFA（金标法）；e. 印迹法。
目前国内临床实验室常用方法为 CLIIF、ELISA、印迹法。其中 ELISA 法的包被抗原一般为人工纯化的 ds-DNA 抗原，抗原在包被过程中，容易造成部分 DNA 内部微店变性解链成单链 DNA，会出现假阳性结果，该方法灵敏度较高，更适用于检测低亲和力抗体；CLIIF 法包被抗原中 ds-DNA 天然、纯净、干扰因素少，特异性较高，较适用于检测高亲和力抗体。印迹法在灵敏度和特异性方面都不如前两者，但操作简单，对技术和经验要求不高。
鉴于以上原因，出现这种看似「矛盾」的结果，作为实验室工作人员，我们该如何进一步做确证实验和与临床医生进行沟通？以下流程图仅供参考，欢迎各位同仁踊跃讨论：
本文作者：石楠，山东济南迪安医院检验中心
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