1 小时未液化的精液标本:该怎么处理?

2016-03-09 07:05 来源:丁香园 作者:孙学廷
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《世界卫生组织:人类精液检查与处理实验手册》上面写道:在室温下,通常在 15 分钟内,精液标本完全液化,很少超过 60 分钟或更长时间。

《临床检验基础》第五版:精液液化缓慢,超过 1 小时或数小时不液化称为精液延迟液化症。

看到这里你知道一小时未液化的精液标本该如何处理吗?大多数人可能都不知道,包括之前的我。我在丁香园论坛上面看到过关于这个问题的讨论,大多数人都是说没液化就那样看、那样报。也有人说只报 PH、精液量、液化时间等。

这些都不对,但是也没错,因为书本上没有写,老师也是这样教的。

但是《世界卫生组织:人类精液检查与处理实验手册》这本书上面就明确指出了关于精液液化延迟标本的处理,下面我们就一起来学习一下。

精液的液化

精液射到收集容器后很快呈现典型的半固体凝胶的团块,通常在室温下几分钟内,精液开始液化(变得稀薄),此时精液中可见异质性混合团块。随着继续液化,精液变得更加匀质和十分稀薄,在液化最后阶段仅存留少量的小凝团。在室温下,通常 15 分钟内,精液标本完全液化,很少超过 60 分钟或更长时间。如果 60 分钟仍未完全液化,应做记录。在家中或使用避孕套收集精液标本,当将标本送到实验室时,一般已经液化。

正常液化的精液标本可能含有不液化的胶冻状颗粒(凝胶状团块),这不表明任何临床意义。然而,黏液丝的存在可能干扰精液分析。

注意 1:液化可以通过如上描述的肉眼观察和显微镜进行识别。随着精液的液化,不动的精子获得活动的能力。如果在显微镜下观察精子不动,则需要更长时间来完成液化过程。

注意 2:液化期间,置室温下或 37 摄氏度孵箱中,在一个二维摇动器上,不断地轻轻混匀或旋转样本容器,有助于产生一个均质的精液标本。

注意 3:如果精液在 30 分钟内不液化,不要开始精液分析,而是再等待 30 分钟。如果 60 分钟后仍未液化,按以下操作处理。

精液液化延迟的处理

有时候精液可能不液化,这使得精液评估变得困难。在这种情况下,需要另行处理,机械混匀或酶消化可能是必要的。

1. 一些标本通过加入等体积的生理培养液(如 Dulbecco 磷酸缓冲盐水),并且用加样器反复吹打,可使其液化。

Dulbecco’s 磷酸盐缓冲液:

(1)Dulbecco’s 葡萄糖 PBS:将 0.2 g 氯化钾(KCL),0.2 g 磷酸二氢钾(KH2P04),0.1 g 氯化镁(MgCL2.6 H2O,8.0 g 氯化钠(NaCl),2.16 g 磷酸氢二钠(NaHPO4.7 H2O)和 1.00 gD-葡萄糖加入到 750 ml 纯净水中。

(2)将 0.132 g 氯化钙(CaCl2.2 H2O)溶于 10 mL 纯净水中,边搅拌边缓慢加入上述溶液中。

(3)用 1 mmol/lNAOH 调节 PH 至 7.4.

(4)用纯净水定容至 1000 mL。

注释: 为了防止出现沉淀,CaCl2 应单独加入,缓慢加入并不断搅拌。

2. 精液反复(6~10 次)缓慢地通过接在注射器的 18 号钝性针头(内径 0.84 mm)或 19 号针头(内径 0.69 mm), 可降低精液的非均匀状态。

3. 应用一种广谱蛋白水解酶(EC)菠萝蛋白酶消化,有助于促使精液液化。

菠萝蛋白酶的准备:

用 Dulbecco 磷酸缓冲盐水制备 10IU/mL 的菠萝酶蛋白酶。波罗蛋白酶很难溶解,通过搅拌,大部分酶应该在 15~20 分钟内溶解。用 10IU/mL 的菠萝酶蛋白酶液与等体积的精液(1:1)(原书为 1+1,应该是手误)进行稀释(1:2),用移液管吸头的尖部搅拌,37 摄氏度孵育 10 分钟。在进一步分析之前充分混匀精液。

注意:这些处理可能影响精浆的生化、精子活力和精子形态,使用它们必须作记录。当计算精子浓度时,必须考虑 1:1(原电子书为 1+1,我考虑应该是错误)加入菠萝蛋白酶液使精液按 1:2 稀释。

尽信书不如无书

一直以来我们都是对老师对前辈听之任之,对于教科书也有如神物一般的崇拜。可惜,我们的教科书太多不足甚至错误的地方。精液分析只是其中小小的一部分,我希望大家都应该在虚心学习的同时,要有怀疑一切的态度。这样我们才会不断的去探索发现,我们才能学习到更多,才能进步!

编辑: 张开平

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